LAPORAN PRAKTIKUM IMUNOLOGI ( PEMERIKSAAN ASTO )

LAPORAN PRAKTIKUM IMUNO-SEROLOGI

Praktikum ke    : V

Hari/Tanggal     : Kamis/02-Mei-2013

Materi              : Pemeriksaan ASTO

Prinsip              :Aglutinasi lateks menggunakan partikel lateks yang dilapisi streptolisin O,  kemudian mereaksikan ini dengan serum penderita.Adanya anti streptolisin dalam serum penderita dinyatakan dengan terjadinya aglutinasi dan partikel tersebut.

Tujuan              :Untuk menentukkan Antibody terhadap Streptococcus β-hemolisa yang menyebabkan rematik ,tonsillitis,dan glomerulus

Metode            : Lateks                                   

Alat dan Bahan :

1.      Tangkai pengaduk                                                                         

2.      Slide hitam                                                 

3.      Clinipete 50 µl

4.      Yellow tipe

5.      Rotatar

6.      Tissu dan kotak sampah

7.      Lateks

8.      Kontrol positif dan negatif

Sampel : Asto H 7

LANDASAN TEORI

            Streptokokus grup A (Streptokokus beta hemolitik) dapat menghasilkan berbagai produk ekstraseluler yang mampu merangsang pembentukan antibodi. Antibodi itu tidak merusak kuman dan tidak memiliki daya perlindungan, tetapi adanya antibodi tersebut dalam serum menunjukkan bahwa di dalam tubuh baru saja terdapat Streptokokus yang aktif. Antibodiyang terbentuk adalah Antistreptolisin O, Antihialuronidase (AH), antistreptokinase (Anti-SK), anti-desoksiribonuklease B (AND-B), dan anti nikotinamid adenine dinukleotidase(anti-NADase).Demam rematik merupakan penyakit vascular kolagen multisystem yang terjadi setelah infeksi Streptokokus grup A pada individu yang memiliki faktor predisposisi. Penyakit ini masih merupakan penyebab terpenting penyakit jantung didapat (acquired heart disease)pada anak dan dewasa muda di banyak negara terutama Negara berkembang. Keterlibatan kardiovaskuler pada penyakit ini ditandai oleh adanya inflamasi endokardium dan mmiokardium melalui suatu proses autoimun yang menyebabkan kerusakan jaringan.Serangan pertama demam reumatik akut terjadi paling sering antara umur 5 –15 tahun.Demam reumatik jarang menyerang anak dibawah umur lima tahun. Demam reumatik akut menyertai faringitis Streptokokus beta hemolitik grup A yang tidak diobati. Pengobatan yang  tuntas terhadap faringitis akut hampir meniadakan risiko terjadinya demam reumatik.Diperkirakan hanya 3 % dari individu yang belum pernah menderita demam reumatik akan menderita komplikasi ini setelah menderita faringitis Streptokokus yang tidak diobati.ASTO (Anti Streptolisin O) merupakan antibodi yang paling banyak dikenal dan paling sering digunakan untuk indikator terdapatnya infeksi Streptokokus. Lebih kurang 80 % penderita demam reumatik menunjukan peningkatan titer antibodi terhadap Streptokokus. Penelitian menunjukkan bahwa komponen Streptokokus yang lain memiliki rekativitas bersama dengan jaringan lain. Ini meliputi reaksi silang imunologik di antara karbohidrat Streptokokus dan glikoprotein katup, diantaranya membran protoplasma Streptokokus dan jaringan saraf subtalamus serta nuclei kaudatus dan antara hialuronat kapsul dan kartilagoartikular.
            Ada dua prinsip dasar penetuan ASTO, yaitu:

1.    Netralisasi/penghambat hemolisis

Streptolisin O dapat menyebabkan hemolisis dari sel darah merah, akan tetapi bila Streptolisin O tersebut di campur lebih dahulu dengan serum penderita yang mengandung cukup anti streptolisin O sebelum di tambahkan pada sel darah merah, maka streptolisin O tersebut akan di netralkan oleh ASO sehingga tidak dapat menibulkan hemolisis lagi.

Pada tes ini serum penderita di encerkan secara serial dan di tambahkan sejumlah streptolisin O yang tetap (Streptolisin O di awetkan dengan sodium thioglycolate). Kemudian di tambahkan suspensi sel darah merah 5%. Hemolisis akan terjadi pada pengenceran serum di mana kadar/titer dari ASO tidak cukup untuk menghambat hemolisis tidak terjadi pada pengencaran serum yang mengandung titer ASO yang tinggi.

2.    Aglutinasi pasif

Streptolisin O merupakan antigen yang larut. Agar dapatmenyebabkan aglutinasi dengan ASO. Maka Streptolisin O perlu disalutkan pada partikel-partikel tertentu. Partikel yangsering dipakai yaitu partikel lateks.Sejumlah tertentu Streptolisin O (yang dapat mengikat 200 IU/ml ASO) di tambahkan pada serum penderita sehingga terjadi ikatan Streptolisin O – anti Strepolisin O (SO – ASO).

Bila dalam serum penderita terdapat ASO lebih dari 200 IU/ml, maka sisa ASO yang tidak terikat oleh Streptolisin O akan menyebabkan aglutinasi dari streptolisin O yang disalurkan pada partikel – partikel latex . Bila kadar ASO dalam serum penderita kurang dari 200 IU / ml , maka tidak ada sisa ASO bebas yang dapat menyebabkan aglutinasi dengan streptolisin O pada partikel – partikel latex.

Tes hambatan hemolisis mempunyai sensitivitas yang cukup baik , sedangkan tes aglutinasi latex memiliki sensitivitas yang sedang. Tes aglutinasi latex hanya dapat mendeteksi ASO dengan titer di atas 200 IU/ml

CARA KERJA

Metode kualitatif

a.      Biarkan sampel dan reagen pada suhu kamar

b.      Teteskan diatas serum slide sebanyak 50 µl.

c.       Tambahhkan lateks sebanyak satu tetes ,lalu aduk

d.      Goyangkan selama 2-3 menit dengan rotator atau dengan tangan

e.      Kalau terjadi aglutinasi (hasil positif) lanjutkan dengan tes kuantitatif

f.        Untuk control positif dan negatif perlakuan sama saperti serum

INTERPRETASI  HASIL

       Negatif (-)   : Tidak terjadi Aglutinasi

       Positif  (+)   : Terjadi Aglutinasi

      

       HASIL PEMERIKSAAN

       Asto H 7 (-) negatif

      

KESIMPULAN

            Berdasarkan hasil pemeriksaan terhadap serum probandus, maka di dapat kesimpulan bahwa serum H7 negatif aglutinasi.

DAFTAR PUSTAKA

-http://www.scribd.com/doc/88455193/Pemeriksaan-Asto
-Diktat materi praktek imonologi-serologi

Mengetahui,                                                                  Palembang , 02-Mei-2013

Dosen pembimbing :                                                                 praktikan

                                                                                               

1.      Drs. Refai Ibrahim, M.Kes

2.      Hamril Dani, AMAK, S.Pd, M.Kes                                    Veronica Nina M.S

3.      Yusneli, AMAK, S.pd                                                         PO.71.34.0.11.0.48

4.      Dr. Billy Setia Negara, MPHM